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超濾離心管的正確使用方法與注意事項(xiàng)
超濾離心管是一種實(shí)驗(yàn)室常用的分離生物樣品的器具,其正確使用方法及注意事項(xiàng)如下:
預(yù)處理:新購(gòu)的超濾離心管使用前需要用純水浸泡并置于冰箱預(yù)冷10分鐘。之后倒出純水,將超濾管置于冰上預(yù)冷2-5分鐘。
加樣:如超濾管中有少許殘留水,可將超濾管內(nèi)管倒置1000×g離心1分鐘,移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
平衡:質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
離心:配平后,以12000 ×g離心(15-30分鐘),等達(dá)到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。
樣本收集:使用完的超濾管用純水反復(fù)清洗5次,再用75%乙醇沖洗3次。
注意事項(xiàng):
超濾管最大離心力不能超過12000g,否則會(huì)導(dǎo)致濾膜破損。
超濾樣本會(huì)損失五分之一至二分之一的樣本量,主要取決于樣本中蛋白含量。
若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入純水,然后用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖。
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