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液氮凍存管操作指南:從分裝到存儲的完整流程解析

更新時間:2025-05-29    點擊次數(shù):344

  液氮凍存管操作指南:從分裝到存儲的完整流程解析

  天津本生液氮凍存管操作全流程指南

  一、?前期準備?

  凍存管選擇?

  優(yōu)先選用聚丙烯(PP)材質內旋蓋凍存管,耐-196℃低溫且密封性強。

  容量建議1.5-2.0mL,分裝時保留10%-20%空間防凍脹破裂。

  樣本處理?

  細胞樣本需調整至對數(shù)生長期(活力>95%),與凍存液(如10% DMSO+90% FBS)混合均勻。

  菌種樣本需與保護劑(如10%甘油)配制成懸液,濃度控制在10?-101?個/mL。




  二、?分裝與標記?

  無菌分裝?

  在超凈臺中操作,避免污染;分裝后立即擰緊管蓋,確保密封性。

  信息標記?

  使用激光雕刻或耐低溫標簽,標注樣本名稱、日期、操作者等關鍵信息。

  三、?程序降溫?

  梯度冷凍?(推薦)

  4℃平衡30分鐘 → -20℃保持2小時 → -80℃預冷4小時 → 轉移至液氮氣相區(qū)(-150℃)過渡1小時。

  快速冷凍?

  使用程序降溫盒(如Mr. Frosty),以-1℃/min速率直接降至-80℃。

  四、?液氮存儲規(guī)范?

  存儲模式?

  氣相存儲?(-150℃~-190℃):適合頻繁存取,溫度波動小。

  液相存儲?(-196℃):長期保存選擇,需嚴格密封防液氮滲入。

  安全措施?

  凍存管需裝入凍存盒或紗布袋,避免直接接觸液氮。

  液氮罐需定期檢查液位(保持≥1/3容量)。

  五、?復蘇操作?

  快速解凍?

  從液氮中取出后立即置入37℃水浴,輕柔搖動1-2分鐘至融化。

  離心去保護劑?

  將細胞懸液轉移至離心管,加入培養(yǎng)基離心后棄上清,重懸接種。

  六、?風險控制?

  防爆管?:選用高質量內旋蓋凍存管,避免直接浸入液相液氮。

  防護裝備?:操作時穿戴低溫手套、護目鏡,防止凍傷或爆管傷害。

  (注:長期存儲樣本建議每5年檢測活性。)

  天津本生一直視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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