本生2.0ml凍存管能耐受-196℃低溫的聚丙烯制成,有硅膠環(huán)以保證密封,所有可立凍存管底部經(jīng)特殊設計,可固定在凍存架或托盤上供單手操作,無菌,無熱源認證。
2.0ml凍存管樣品的制備:
1、培養(yǎng)細胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
(1)在合適的鹽濃度下,應保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復性。
(2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價結(jié)合的蛋白質(zhì)復合物和共價鍵二硫鍵,使其形成一個各自多肽的溶液。
(3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
(4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應在低溫下進行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
(5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復凍融。
2、組織樣品的制備:
手術切除的組織塊迅速置于預冷的0.95生理鹽水中,漂洗數(shù)次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,加入相應體積的裂解液進行勻漿,離心收集上清加入Laemmli樣品緩沖液強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒。